作者：霍尔德科技 更新时间：2024-09-02
叶绿素a是估算浮游植物生物量的重要指标，可以通过测定水中浮游植物叶绿素a的含量，掌握水体的初级生产力情况和富营养化水平，在环境监测中，叶绿素a含量是评价水体富营养化的指标之一。水质叶绿素a测定方法原理是将一定量样品用滤膜过滤截留藻类，研磨破碎藻类细胞，用丙酮溶液提取叶绿素，离心分离后分别于750nm、664nm、647nm和630nm波长处测定提取液吸光度，根据公式计算水中叶绿素a的浓度。下面小编分享一下水质叶绿素a测定的具体步骤。
1.制备水样
在过滤装置上装好玻璃纤维滤膜。根据水体的营养状态确定取样体积，具体可以参考过滤水样体积，用量筒量取一定体积的混匀水样，进行过滤，最后用少量蒸馏水冲洗滤器壁。过滤时负压不超过50kPa，在水样刚刚完全通过滤膜时结束抽滤，用镊子将滤膜取出，将有水样的一面对折，用滤纸吸干滤膜水分。
2.研磨
将样品滤膜放置于研磨装置中，加入3ml-4ml丙酮溶液，研磨至糊状。补加3ml-4ml丙酮溶液，继续研磨，并重复1-2次，保证充分研磨5min以上。将完全破碎后的细胞提取液转移至玻璃刻度离心管中，用丙酮溶液冲洗研钵及研磨杵，一并转入离心管中，定容至10ml。
3.浸泡提取
将离心管中的研磨提取液充分振荡混匀后，用铝箔包好，放置于4℃避光浸泡提取2h以上，不超过24h。在浸泡过程中要颠倒摇匀2-3 次。
4.离心
将离心管放入离心机，以相对离心力1000×g（转速 3000 r/min～4000 r/min）离心10min。然后用针式滤器过滤上清液得到叶绿素a的丙酮提取液（试样）待测。
5.水样测定
将试样移至比色皿中，以丙酮溶液为参比溶液，于波长750nm、664nm、647nm、630nm处测量吸光度。750nm波长处的吸光度应小于0.005，否则需重新用针式滤器过滤后测定。
6.计算
最后水样中叶绿素a的质量浓度可以按照相应公式进行计算得出。
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